ソニー株式会社 | Large Particle Sorting Option

直径25~60µmの大径の粒子や細胞の分取が可能なMA900およびSH800のソフトウェアオプション

ソニーが開発した新機能により、大径の粒子や細胞のソーティングが可能になりました。このMA900およびSH800のソフトウェアオプションは、標準的なセルソーターで分取が難しい直径25〜60µm程度の大径の粒子や細胞を分取するためにデザインされています。

gen0_ナノバイアル — Hydrogel microcarriers
(画像はPartillion Bioscience社
Nanovial)

gen0_マイクロキャリア — Double - emulsion droplets
(画像はSamplix社DE50)

特長

リカバリーの大幅改善が自動で可能に

標準的なセルソーターで大径粒子を分取しても、リカバリーは低くなりがちです。手動でパラメーターを調整しても、投入した時間に見合ったリカバリーの劇的な改善は見られません。しかし、大径粒子ソートオプションを使用することで、複雑な手動調整なしで90%を超えるリカバリーを達成することが可能です。

MA900を使用しPartillion Bioscience社のNanovial（直径50µm）を分取し、通常のソフトウェア使用時と大径粒子ソートオプション使用時でリカバリーを比較した。大径粒子ソートオプションの設定は、Particle Size Selection （Large）を選択し、Recovery modeを使用した。

染色したNanovialと無染色のNanovialを1：9で混合したサンプルにおいて、染色したNanovialをMA900でソートし、purityを算出した。また、顕微鏡での目視観察を実施した。

ソニーのセルソーターをアップデートするだけで大径粒子ソートが可能に

ソニーのセルソーター（MA900もしくはSH800）をお持ちの場合、装置をアップデートするだけで大径粒子ソートオプションを使用できます。新規に装置を購入する必要はなく※、特別なサイズのソーティングチップを購入する必要もありません。従来の130µmのソーティングチップで大径粒子の分取が可能です。（※お持ちの装置のバージョンにより、当オプションの対応可否が異なります。）

Applications

スフェロイドや腫瘍細胞などの大型で不規則な形状の細胞は、疾患の研究において重要な役割を果たしており、効率的な分取によってそれらの機能や相互作用についてより深く調査することが可能になります。

MA900を使用し、96ウェルプレートに直径60μm程度のスフェロイドを1細胞ごとに分取、シングルセルソート成功率を計算した。また、ソートを試みた96個のうち、合計何個を回収できたかを計測した（リカバリー数）。加えて、ソート後のスフェロイドの蛍光画像を顕微鏡で撮影した（上記画像はHEK293Tの例）。HEP G2、HEK 293T、HeLaの3種類の腫瘍細胞のスフェロイドについて上記の実験を実施した。大径粒子ソートオプションの設定は、Particle Size Selection （Very Large）を選択し、Recovery modeを使用した。

ダブルエマルジョンやハイドロゲルマイクロキャリアは、高いスループットによる単一細胞メタボローム解析やゲノム解析を可能し、抗体医薬品開発など様々な分野で研究開発を加速させます。

蛍光ビーズ付きのDE50（直径75µm）を顕微鏡スライドに分取し、以下の3条件でリカバリーの比較を行った。①通常のソフトウェアを使用しパラメーターの調整を加えなかった場合（No adjustments）、②通常のソフトウェアを使用しパラメーターの調整を加えた場合（Manually adjusted drop delay）、③大径粒子ソートオプションを使用した場合。大径粒子ソートオプションの設定は、Particle Size Selection （Very Large）を選択し、 Recovery modeを使用した。①および③についてはMA900で実験を行い、 ②についてはSH800で実験を行った。

30~65µmの直径のNanovialをMA900で分取し、大径粒子ソートオプションのRecovery mode（紺色）、通常ソフトウェアのSingle Cell (3 drops) mode（水色）、通常ソフトウェアのSingle Cell mode（黄色）の3パターンでリカバリーを比較した。

Specifications

対象粒子サイズ	25-60µm （対象粒子の性質によりソート可能なサイズは異なります。詳しくは営業担当者にお問い合わせください）
アプリケーション	大径細胞、ダブルエマルジョン、ハイドロゲルマイクロキャリア等
ソーティング方法	2方向 / 96マルチウェルプレート
ソーティングチップ	130µm
セットアップ	オート
機能概要	Auto Calibration for 25 to 35µm particles： 25~35µmの粒子サイズに最適化された自動調整オプション Particle size selection：大径粒子の検出を最適化しソート効率を向上 Recovery mode：大径細胞の回収率を最大化するソートモードを追加 Priority option：指定したターゲット粒子のソート効率を向上
ソフトウェアバージョン	MA900 ver. 3.3.3, ver. 3.2.3, SH800 ver.2.1.8 （お持ちの装置のバージョンにより、当オプションの対応可否が異なります。詳しくは営業担当者にお問い合わせ下さい）

Performances

	Setting	Recovery (%)	Sorting speed (eps)	Purity (%)
35µm Particles	Normal	~60	~1000	90~
35µm Particles	Large Particle Sorting Option	75~95	~1000	90~
50µm Particles	Normal	~30	~400	90~
50µm Particles	Large Particle Sorting Option	75~95	~400	90~

（上記パフォーマンスの数値は対象粒子の性質により変化する可能性があります）